regmedjournalРегенерация органов и тканейРегенерация органов и тканей2949-5938Общество регенеративной медицины10.60043/2949-5938-2024-2-24-45regmedjournal-66Research ArticleОБЗОРЫ И КОММЕНТАРИИREVIEWS AND COMMENTSСоздание и характеристика культур мезенхимных стромальных клеток человека с пролонгированным пролиферативным потенциалом для задач регенеративной медициныCreation and characterization of human mesenchymal stromal cell cultures with prolonged proliferative potential for the tasks of regenerative medicineПримакА. Л.PrimakA. L.

Примак Александра Леонидовна - аспирант, лаборант-исследователь НИЛ генных и клеточных технологий

119192, Ломоносовский проспект, 27, к. 10, Москва

Alexandra L. Primak - post-graduate researcher, Laboratory Researcher, Laboratory of Gene and Cell Technologies

119192, Lomonosovsky prospect, 27/1, Moscow

КалининаН. И.KalininaN. I.

Калинина Наталья Игоревна - к.б.н., ведущий научный сотрудник, Научно- исследовательская лаборатория генных и клеточных технологий

119192, Ломоносовский проспект, 27, к. 10, Москва

Natalia I. Kalinina - Cand. Sci. (Biology), Leading Researcher, Laboratory of Gene and Cell Technologies

119192, Lomonosovsky prospect, 27/1, Moscow

n_i_kalinina@mail.ruСкрябинаМ. Н.SkryabinaM. N.

Скрябина Мария Никитична - студентка, факультет фундаментальной медицины

119192, Ломоносовский проспект, 27, к. 10, Москва

Maria N. Skryabina - student

119192, Lomonosovsky prospect, 27/1, Moscow

УсачевВ. А.UsachevV. A.

Усачев Владимир Александрович - лаборант, межфакультетская научно-исследовательская лаборатория трансляционной медицины

119192, Ломоносовский проспект, 27, к. 10, Москва

Vladimir A. Usachev - phD student, Laboratory Assistant, Laboratory of Translational Medicine

119192, Lomonosovsky prospect, 27/1, Moscow

ЧечехинВ. И.ChechekhinV. I.

Чечехин Вадим Игоревич - к.б.н., младший научный сотрудник

119192, Ломоносовский проспект, 27, к. 10, Москва

Vadim I. Chechekhin - Cand. Sci. (Biology), Junior Researcher, Laboratory of Gene and Cell Technologies

119192, Lomonosovsky prospect, 27/1, Moscow

ВиговскийМ. А.VigovskiyM. A.

Виговский Максим Александрович - лаборант, лаборатория репарации и регенерации тканей, Институт регенеративной медицины

119192, Ломоносовский проспект, 27, к. 10, Москва

Maksim A. Vigovskiy - phD student, Laboratory Assistant, Laboratory of Tissue Repair andRegeneration, Institute for Regenerative Medicine

119192, Lomonosovsky prospect, 27/1, Moscow

ЧечехинаЕ. С.ChechekhinaE. S.

Чечехина Елизавета Сергеевна - лаборант, кафедра биохимии и регенеративной биомедицины

119192, Ломоносовский проспект, 27, к. 10, Москва

Elizaveta S. Chechekhina - phD student, Laboratory Assistant, Department of Biochemistry and Regenerative Biomedicine

119192, Lomonosovsky prospect, 27/1, Moscow

ВолошинН. С.VoloshinN. S.

Волошин Никита Сергеевич — лаборант, кафедра биохимии и регенеративной биомедицины

119192, Ломоносовский проспект, 27, к. 10, Москва

Nikita S. Voloshin - phD student, Laboratory Assistant, Department of Biochemistry and Regenerative Biomedicine

119192, Lomonosovsky prospect, 27/1, Moscow

КулебякинК. Ю.KulebyakinK. Yu.

Кулебякин Константин Юрьевич - к.б.н., доцент, кафедра биохимии и регенеративной биомедицины

119192, Ломоносовский проспект, 27, к. 10, Москва

Konstantin Yu. Kulebyakin - Cand. Sci. (Biology), Associate Professor, Department of Biochemistry and Regenerative Biomedicine

119192, Lomonosovsky prospect, 27/1, Moscow

КулебякинаМ. А.KulebyakinaM. A.

Кулебякина Мария Александровна - младший научный сотрудник, НИЛ генных и клеточных технологий

119192, Ломоносовский проспект, 27, к. 10, Москва

Maria A. Kulebyakina - phD student, Junior Researcher, Laboratory of Gene and Cell Technologies

119192, Lomonosovsky prospect, 27/1, Moscow

ГригорьеваО. А.GrigorievaO. A.

Григорьева Ольга Александровна - к.б.н., научный сотрудник, лаборатория репарации и регенерации тканей, Институт регенеративной медицины

119192, Ломоносовский проспект, 27, к. 10, Москва

Olga A. Grigorieva - Cand. Sci. (Biology), Research Associate, Laboratory of Tissue Repair and Regeneration

119192, Lomonosovsky prospect, 27/1, Moscow

Тюрин-КузьминП. А.Tyurin-KuzminP. A.

Тюрин-Кузьмин Петр Алексеевич - к.б.н., доцент

119192, Ломоносовский проспект, 27, к. 10, Москва

Pyotr A. Tyurin-Kuzmin - Cand. Sci. (Biology), Associate Professor

119192, Lomonosovsky prospect, 27/1, Moscow

ЯковлеваТ. К.YakovlevaT. K.

Яковлева Татьяна Кирилловна - к.б.н., старший научный сотрудник, лаборатория морфологии клетки

94064, Тихорецкий проспект, 4, Санкт-Петербург

Tatiana K. Yakovleva - Cand. Sci. (Biology), Senior Researcher, Laboratory of Cell Morphology

194064, Tikhoretsky prospect, 4, St. Petersburg

ТуриловаВ. И.TurilovaV. I.

Турилова Виктория Игоревна - ведущий инженер, лаборатория морфологии клетки

194064, Тихорецкий проспект, 4, Санкт-Петербург

Victoria I. Turylova - Leading Engineer, Laboratory of Cell Morphology

194064, Tikhoretsky prospect, 4, St. Petersburg

ШагимардановаЕ. И.ShagimardanovaE. I.

Шагимарданова Елена Ильясовна - к.б.н., ведущий научный сотрудник

420012, ул. Карла Маркса, 76, Казань

Elena I. Shagimardanova - Cand. Sci. (Biology), Leading Researcher

420012, K. Marx str, 76, Kazan

ГазизоваГ. Р.GazizovaG. R.

Газизова Гузель Рашитовна - научный сотрудник

420012, ул. Карла Маркса, 76, Казань

Guzel R. Gazizova - Researcher

420012, K. Marx str, 76, Kazan

БасаловаН. А.BasalovaN. A.

Басалова Наталия Андреевна - к.б.н., младший научный сотрудник

119192, Ломоносовский проспект, 27, к. 10, Москва

Natalia A. Basalova - Cand. Sci. (Biology), Junior Researcher

119192, Lomonosovsky prospect, 27/1, Moscow

ЕфименкоА. Ю.EfimenkoA. Yu.

Ефименко Анастасия Юрьевна - к.м.н., зав. лабораторией, Институт регенеративной медицины

119192, Ломоносовский проспект, 27, к. 10, Москва

Anastasia Yu. Efimenko - Cand. Sci. (Medicine), Head of Laboratory

119192, Lomonosovsky prospect, 27/1, Moscow

ДжауариС. С.DzhauariS. S.

Джауари Сталик Станиславович - аспирант, лаборант-исследователь НИЛ генных и клеточных технологий

119192, Ломоносовский проспект, 27, к. 10, Москва

Stalik S. Dzhauari - post-graduate researcher, Laboratory Researcher, Laboratory of Gene and Cell Technologies

119192, Lomonosovsky prospect, 27/1, Moscow

АнтроповаЮ. Г.AntropovaYu. G.

Антропова Юлия Георгиевна - к.б.н., старший научный сотрудник, кафедра биохимии и регенеративной биомедицины

119192, Ломоносовский проспект, 27, к. 10, Москва

Yulia G. Antropova - Cand. Sci. (Biology), Senior Researcher, Department of Biochemistry and Regenerative Biomedicine

119192, Lomonosovsky prospect, 27/1, Moscow

ПлющийИ. В.PlyushchiiI. V.

Плющий Иван Владимирович - магистр, кафедра биохимии и регенеративной биомедицины

119192, Ломоносовский проспект, 27, к. 10, Москва

Ivan V. Plyushchiy - Master’s Student, Department of Biochemistry and Regenerative Biomedicine

119192, Lomonosovsky prospect, 27/1, Moscow

АкопянЖ. А.AkopyanZh. A.

Акопян Жанна Алексеевна - к.м.н., заместитель директора; заведующий кафедрой

119192, Ломоносовский проспект, 27, к. 10, Москва

Zhanna A. Akopyan - Cand. Sci. (Medicine), Deputy Director; Head of the Department

119192, Lomonosovsky prospect, 27/1, Moscow

СысоеваВ Ю.SysoevaV. Yu.

Сысоева Вероника Юрьевна - к.б.н., ведущий научный сотрудник, лаборатория морфогенеза и репарации тканей

119192, Ломоносовский проспект, 27, к. 10, Москва

Veronika Yu. Sysoeva - Cand. Sci. (Biology), Leading Researcher, Laboratory of Morphogenesis and Tissue Repair

119192, Lomonosovsky prospect, 27/1, Moscow

ТкачукВ. А.TkachukV. A.

Ткачук Всеволод Арсеньевич - академик РАН, директор

119192, Ломоносовский проспект, 27, к. 10, Москва

Vsevolod A. Tkachuk - Academician of the Russian Academy of Sciences, Director

119192, Lomonosovsky prospect, 27/1, Moscow

КарагяурМ. Н.KaragyaurM. N.

Карагяур Максим Николаевич - к.б.н., старший научный сотрудник

119192, Ломоносовский проспект, 27, к. 10, Москва

Maxim N. Karagyaur - Cand. Sci. (Biology), Senior Researcher; Associate Professor

119192, Lomonosovsky prospect, 27/1, Moscow

Факультет фундаментальной медицины, Московский государственный университет имени М.В. ЛомоносоваРоссияFaculty of Medicine, Lomonosov Moscow State UniversityRussian FederationФакультет фундаментальной медицины, Московский государственный университет имени М.В. ЛомоносоваРоссияFaculty of Medicine, Lomonosov Moscow State UniversityRussian FederationФакультет фундаментальной медицины, Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова; Институт регенеративной медицины, Медицинский научно-образовательный центр, Московский государственный университет имени М.В. ЛомоносоваРоссияFaculty of Medicine, Lomonosov Moscow State University; Institute for Regenerative Medicine, Medical Research and Education Center, Lomonosov Moscow State UniversityRussian FederationИнститут цитологии Российской академии наукРоссияInstitute of Cytology, Russian Academy of SciencesRussian FederationИнститут фундаментальной медицины и биологии, Казанский (Приволжский) федеральный университетРоссияInstitute of Fundamental Medicine and Biology, Kazan (Volga Region) Federal UniversityRussian FederationФакультет фундаментальной медицины, Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова; Институт регенеративной медицины, Медицинский научно-образовательный центр, Московский государственный университет имени М.В. ЛомоносоваРоссияFaculty of Medicine, Lomonosov Moscow State University; Institute for Regenerative Medicine, Medical Research and Education Center, Lomonosov Moscow State UniversityRussian Federation202422032025222445Copyright © Примак А.Л., Калинина Н.И., Скрябина М.Н., Усачев В.А., Чечехин В.И., Виговский М.А., Чечехина Е.С., Волошин Н.С., Кулебякин К.Ю., Кулебякина М.А., Григорьева О.А., Тюрин-Кузьмин П.А., Яковлева Т.К., Турилова В.И., Шагимарданова Е.И., Газизова Г.Р., Басалова Н.А., Ефименко А.Ю., Джауари С.С., Антропова Ю.Г., Плющий И.В., Акопян Ж.А., Сысоева В.Ю., Ткачук В.А., Карагяур М.Н., 20252025Примак А.Л., Калинина Н.И., Скрябина М.Н., Усачев В.А., Чечехин В.И., Виговский М.А., Чечехина Е.С., Волошин Н.С., Кулебякин К.Ю., Кулебякина М.А., Григорьева О.А., Тюрин-Кузьмин П.А., Яковлева Т.К., Турилова В.И., Шагимарданова Е.И., Газизова Г.Р., Басалова Н.А., Ефименко А.Ю., Джауари С.С., Антропова Ю.Г., Плющий И.В., Акопян Ж.А., Сысоева В.Ю., Ткачук В.А., Карагяур М.Н.Primak A.L., Kalinina N.I., Skryabina M.N., Usachev V.A., Chechekhin V.I., Vigovskiy M.A., Chechekhina E.S., Voloshin N.S., Kulebyakin K.Y., Kulebyakina M.A., Grigorieva O.A., Tyurin-Kuzmin P.A., Yakovleva T.K., Turilova V.I., Shagimardanova E.I., Gazizova G.R., Basalova N.A., Efimenko A.Y., Dzhauari S.S., Antropova Y.G., Plyushchii I.V., Akopyan Z.A., Sysoeva V.Y., Tkachuk V.A., Karagyaur M.N.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.regmed-journal.ru/jour/article/view/66

Изучение молекулярных механизмов процессов регенерации требует удобных объектов для in vitro и in vivo исследований. In vitro такую функцию могут выполнять клеточные культуры. Существенным ограничением применения клеточных культур, полученных из тканей пациента, является их быстрое старение и утрата специфичных свойств исходной клеточной культуры. Возможным подходом к пролонгированию пролиферативной активности и сохранению свойств первичной клеточной культуры является повышение экспрессии каталитического компонента теломеразы (TERT). В данном исследовании мы оценили эффективность получения культур мезенхимных стромальных клеток (МСК) жировой ткани человека с пролонгированным пролиферативным потенциалом путем принудительной гиперэкспрессии гена TERT человека и изучили свойства полученных культур. Было установлено, что полученные культуры МСК способны преодолевать до 38–63 удвоений клеточной популяции (УКП), сохраняют чувствительность к норадреналину, серотонину, глутамату, ГАМК, паратиреоидному гормону, ангиотензину II и гистамину по меньшей мере до 26 УКП, сохраняют МСК-специфичный иммунофенотип до 36 УКП, а также способность к дифференцировке в адипогенном, остеогенном и хондрогенном направлении — не менее чем до 39 УКП. Более того, генетическая модификация культур МСК геном TERT человека (hTERT) позволяет стабилизировать качественный и количественный состав секретома МСК при длительном пассировании (по меньшей мере до 30 УКП). Полученные результаты позволяют рассматривать гиперэкспрессию TERT как перспективный подход к получению культур МСК с пролонгированной пролиферативной активностью, а сами культуры тМСК — как стабильный и удобный объект для решения широкого спектра фундаментальных и прикладных задач регенеративной медицины.

The study of molecular mechanisms of regeneration requires convenient models for in vitro and in vivo studies. In vitro cell cultures can fulfill such a function. However, their rapid aging and loss of initial specific properties in culture is a significant limitation of their use. Telomerase expression can help to overcome these limitations: it can prolong proliferative activity and stabilize the initial properties of a primary cell culture. Here, we created and studied the properties of human adipose tissue multipotent mesenchymal stromal cell (MSC) cultures that overexpress the catalytic protein subunit of human telomerase ( hTERT). We found that these MSC cultures were able to proliferate up to 38–63 PD, kept sensitivity to noradrenaline, serotonin, glutamate, γ-aminobutyric acid, parathyroid hormone, angiotensin II and histamine until at least 26 PD, retained MSC-specific immunophenotype until at least 36 PD, and preserved the ability to adipogenic, osteogenic and chondrogenic differentiation until at least 39 PD. Moreover, overexpression of hTERT in MSC cultures stabilized the qualitative and quantitative composition of their secretome at long-term passaging (at least up to 30 PD). The obtained results allow us to consider telomerase hyperexpression as a promising approach to obtaining MSC cultures with prolonged proliferative activity, which can be used as a stable and convenient object for fundamental and applied studies in the field of regenerative medicine.

мезенхимные стромальные клеткикаталитический компонент теломеразыдифференцировкачувствительность к гормонамкариотипированиеростовые факторыmesenchymal stromal cellstelomerase catalytic protein subunitdifferentiationhormone sensitivitykaryotypinggrowth factorsИсследование выполнено за счет гранта Российского научного фонда (проект №19-75-30007), https://rscf.ru/project/19-75-30007/The study was funded by the Russian Science Foundation No 19-75-30007, https://rscf.ru/project/19-75-30007/ReferencesVarier P, Raju G, Madhusudanan P, Jerard C, Shankarappa SA. A Brief Review of In Vitro Models for Injury and Regeneration in the Peripheral Nervous System. Int J Mol Sci. 2022;23(2):816. DOI: 10.3390/ijms23020816Varier P, Raju G, Madhusudanan P, Jerard C, Shankarappa SA. A Brief Review of In Vitro Models for Injury and Regeneration in the Peripheral Nervous System. Int J Mol Sci. 2022;23(2):816. DOI: 10.3390/ijms23020816Karagyaur M, Primak A, Efimenko A, Skryabina M, Tkachuk V. The Power of Gene Technologies: 1001 Ways to Create a Cell Model. Cells. 2022;11(20):3235. DOI: 10.3390/cells11203235Karagyaur M, Primak A, Efimenko A, Skryabina M, Tkachuk V. The Power of Gene Technologies: 1001 Ways to Create a Cell Model. Cells. 2022;11(20):3235. DOI: 10.3390/cells11203235Voloshin N, Tyurin-Kuzmin P, Karagyaur M, Akopyan Z, Kulebyakin K. Practical Use of Immortalized Cells in Medicine: Current Advances and Future Perspectives. Int J Mol Sci. 2023;24(16):12716. DOI: 10.3390/ijms241612716Voloshin N, Tyurin-Kuzmin P, Karagyaur M, Akopyan Z, Kulebyakin K. Practical Use of Immortalized Cells in Medicine: Current Advances and Future Perspectives. Int J Mol Sci. 2023;24(16):12716. DOI: 10.3390/ijms241612716Lenz LS, Wink MR. The other side of the coin: mesenchymal stromal cell immortalization beyond evasion of senescence. Hum Cell. 2023;36(5):1593–1603. DOI: 10.1007/s13577-023-00925-3Lenz LS, Wink MR. The other side of the coin: mesenchymal stromal cell immortalization beyond evasion of senescence. Hum Cell. 2023;36(5):1593–1603. DOI: 10.1007/s13577-023-00925-3Basalova N, Illarionova M, Skryabina M, Vigovskiy M, Tolstoluzhinskaya A, Primak A, et al. Advances and Obstacles in Using CRISPR/Cas9 Technology for Non-Coding RNA Gene Knockout in Human Mesenchymal Stromal Cells. Noncoding RNA. 2023;9(5):49. DOI: 10.3390/ncrna9050049Basalova N, Illarionova M, Skryabina M, Vigovskiy M, Tolstoluzhinskaya A, Primak A, et al. Advances and Obstacles in Using CRISPR/Cas9 Technology for Non-Coding RNA Gene Knockout in Human Mesenchymal Stromal Cells. Noncoding RNA. 2023;9(5):49. DOI: 10.3390/ncrna9050049Hahn WC. Immortalization and transformation of human cells. Mol Cells. 2002;13(3):351–361, DOI: 10.1016/S1016-8478(23)15045-XHahn WC. Immortalization and transformation of human cells. Mol Cells. 2002;13(3):351–361, DOI: 10.1016/S1016-8478(23)15045-XMeltzer PS, Guan XY, Trent JM. Telomere capture stabilizes chromosome breakage. Nat Genet. 1993;4(3):252–255. DOI: 10.1038/ng0793-252Meltzer PS, Guan XY, Trent JM. Telomere capture stabilizes chromosome breakage. Nat Genet. 1993;4(3):252–255. DOI: 10.1038/ng0793-252Richter M, Piwocka O, Musielak M, Piotrowski I, Suchorska WM, Trzeciak T. From Donor to the Lab: A Fascinating Journey of Primary Cell Lines. Front Cell Dev Biol. 2021;9:711381. DOI: 10.3389/fcell.2021.711381Richter M, Piwocka O, Musielak M, Piotrowski I, Suchorska WM, Trzeciak T. From Donor to the Lab: A Fascinating Journey of Primary Cell Lines. Front Cell Dev Biol. 2021;9:711381. DOI: 10.3389/fcell.2021.711381Longo PA, Kavran JM, Kim MS, Leahy DJ. Transient mammalian cell transfection with polyethylenimine (PEI). Methods Enzymol. 2013;529:227–240. DOI: 10.1016/B978-0-12-418687-3.00018-5Longo PA, Kavran JM, Kim MS, Leahy DJ. Transient mammalian cell transfection with polyethylenimine (PEI). Methods Enzymol. 2013;529:227–240. DOI: 10.1016/B978-0-12-418687-3.00018-5Tyurin-Kuzmin PA, Karagyaur MN, Kulebyakin KY, Dyikanov DT, Chechekhin VI, Ivanova AM, et al. Functional Heterogeneity of Protein Kinase A Activation in Multipotent Stromal Cells. Int J Mol Sci. 2020;21(12):4442. DOI: 10.3390/ijms21124442Tyurin-Kuzmin PA, Karagyaur MN, Kulebyakin KY, Dyikanov DT, Chechekhin VI, Ivanova AM, et al. Functional Heterogeneity of Protein Kinase A Activation in Multipotent Stromal Cells. Int J Mol Sci. 2020;21(12):4442. DOI: 10.3390/ijms21124442Böcker W, Yin Z, Drosse I, Haasters F, Rossmann O, Wierer M, et al. Introducing a singlecell-derived human mesenchymal stem cell line expressing hTERT after lentiviral gene transfer. J Cell Mol Med. 2008;12(4):1347–1359. DOI: 10.1111/j.1582-4934.2008.00299.xBöcker W, Yin Z, Drosse I, Haasters F, Rossmann O, Wierer M, et al. Introducing a singlecell-derived human mesenchymal stem cell line expressing hTERT after lentiviral gene transfer. J Cell Mol Med. 2008;12(4):1347–1359. DOI: 10.1111/j.1582-4934.2008.00299.xJun ES, Lee TH, Cho HH, Suh SY, Jung JS. Expression of telomerase extends longevity and enhances differentiation in human adipose tissue-derived stromal cells. Cell Physiol Biochem. 2004;14(4–6):261–268. DOI: 10.1159/000080335Jun ES, Lee TH, Cho HH, Suh SY, Jung JS. Expression of telomerase extends longevity and enhances differentiation in human adipose tissue-derived stromal cells. Cell Physiol Biochem. 2004;14(4–6):261–268. DOI: 10.1159/000080335Kulebyakin K, Tyurin-Kuzmin P, Efimenko A, Voloshin N, Kartoshkin A, Karagyaur M, et al. Decreased Insulin Sensitivity in Telomerase-Immortalized Mesenchymal Stem Cells Affects Efficacy and Outcome of Adipogenic Differentiation in vitro. Front Cell Dev Biol. 2021;9:662078. DOI: 10.3389/fcell.2021.662078Kulebyakin K, Tyurin-Kuzmin P, Efimenko A, Voloshin N, Kartoshkin A, Karagyaur M, et al. Decreased Insulin Sensitivity in Telomerase-Immortalized Mesenchymal Stem Cells Affects Efficacy and Outcome of Adipogenic Differentiation in vitro. Front Cell Dev Biol. 2021;9:662078. DOI: 10.3389/fcell.2021.662078Ozkinay C, Mitelman F. A simple trypsin-Giemsa technique producing simultaneous Gand C-banding in human chromosomes. Hereditas. 1979;90(1):1–4. DOI: 10.1111/j.1601-5223.1979.tb01287.xOzkinay C, Mitelman F. A simple trypsin-Giemsa technique producing simultaneous Gand C-banding in human chromosomes. Hereditas. 1979;90(1):1–4. DOI: 10.1111/j.1601-5223.1979.tb01287.xAn International System for Human Cytogenomic Nomenclature. Eds. McGowan-Jordan J, Hastings RS, Moore S. S.Karger AG, Basel (Switzerland), 2020. DOI: 10.1159/isbn.978-3-318-06867-2An International System for Human Cytogenomic Nomenclature. Eds. McGowan-Jordan J, Hastings RS, Moore S. S.Karger AG, Basel (Switzerland), 2020. DOI: 10.1159/isbn.978-3-318-06867-2Dominici M, Le Blanc K, Mueller I, Slaper-Cortenbach I, Marini FC, Krause DS, et al. Minimal Criteria for Defining Multipotent Mesenchymal Stromal Cells. The International Society for Cellular Therapy Position Statement. Cytotherapy. 2006;8:315–317. DOI: 10.1080/14653240600855905Dominici M, Le Blanc K, Mueller I, Slaper-Cortenbach I, Marini FC, Krause DS, et al. Minimal Criteria for Defining Multipotent Mesenchymal Stromal Cells. The International Society for Cellular Therapy Position Statement. Cytotherapy. 2006;8:315–317. DOI: 10.1080/14653240600855905Bourin P, Bunnell BA, Casteilla L, Dominici M, Katz AJ, March KL, et al. Stromal cells from the adipose tissue-derived stromal vascular fraction and culture expanded adipose tissuederived stromal/stem cells: a joint statement of the International Federation for Adipose Therapeutics and Science (IFATS) and the International Society for Cellular Therapy (ISCT). Cytotherapy. 2013;15(6):641–648. DOI: 10.1016/j.jcyt.2013.02.006Bourin P, Bunnell BA, Casteilla L, Dominici M, Katz AJ, March KL, et al. Stromal cells from the adipose tissue-derived stromal vascular fraction and culture expanded adipose tissuederived stromal/stem cells: a joint statement of the International Federation for Adipose Therapeutics and Science (IFATS) and the International Society for Cellular Therapy (ISCT). Cytotherapy. 2013;15(6):641–648. DOI: 10.1016/j.jcyt.2013.02.006Viswanathan S., Shi Y., Galipeau J., Krampera M., Leblanc K., Martin I. et al. Mesen-chymal Stem versus Stromal Cells: International Society for Cell & Gene Therapy (ISCT®) Mesenchymal Stromal Cell Committee Position Statement on Nomenclature. Cytother. 2019;21(10):1019–1024. DOI: 10.1016/j.jcyt.2019.08.002Viswanathan S., Shi Y., Galipeau J., Krampera M., Leblanc K., Martin I. et al. Mesen-chymal Stem versus Stromal Cells: International Society for Cell & Gene Therapy (ISCT®) Mesenchymal Stromal Cell Committee Position Statement on Nomenclature. Cytother. 2019;21(10):1019–1024. DOI: 10.1016/j.jcyt.2019.08.002Zietzer A, Hosen MR, Goody PR, Werner N, Nickenig G, Jansen F. HnRNPU regulates intra-and intercellular microRNA trafficking in a sequence specific manner, Europ Heart J. 2020;41(Suppl. 2):ehaa946.3611. DOI: 10.1093/ehjci/ehaa946.3611Zietzer A, Hosen MR, Goody PR, Werner N, Nickenig G, Jansen F. HnRNPU regulates intra-and intercellular microRNA trafficking in a sequence specific manner, Europ Heart J. 2020;41(Suppl. 2):ehaa946.3611. DOI: 10.1093/ehjci/ehaa946.3611Zietzer A, Hosen MR, Wang H, Goody PR, Sylvester M, Latz E, et al. The RNA-binding protein hnRNPU regulates the sorting of microRNA-30c-5p into large extracellular vesicles. J Extracell Vesicles. 2020;9(1):1786967. DOI: 10.1080/20013078.2020.1786967Zietzer A, Hosen MR, Wang H, Goody PR, Sylvester M, Latz E, et al. The RNA-binding protein hnRNPU regulates the sorting of microRNA-30c-5p into large extracellular vesicles. J Extracell Vesicles. 2020;9(1):1786967. DOI: 10.1080/20013078.2020.1786967Karagyaur M, Primak A, Efimenko A, Skryabina M, Tkachuk V. The Power of Gene Technologies: 1001 Ways to Create a Cell Model. Cells. 2022;11(20):3235. DOI: 10.3390/cells11203235Karagyaur M, Primak A, Efimenko A, Skryabina M, Tkachuk V. The Power of Gene Technologies: 1001 Ways to Create a Cell Model. Cells. 2022;11(20):3235. DOI: 10.3390/cells11203235Chen J. The Cell-Cycle Arrest and Apoptotic Functions of p53 in Tumor Initiation and Progression. Cold Spring Harb Perspect Med. 2016;6(3):a026104. DOI: 10.1101/cshperspect.a026104Chen J. The Cell-Cycle Arrest and Apoptotic Functions of p53 in Tumor Initiation and Progression. Cold Spring Harb Perspect Med. 2016;6(3):a026104. DOI: 10.1101/cshperspect.a026104Engeland K. Cell cycle regulation: p53-p21-RB signaling. Cell Death Differ. 2022;29(5):946–960. DOI: 10.1038/s41418-022-00988-zEngeland K. Cell cycle regulation: p53-p21-RB signaling. Cell Death Differ. 2022;29(5):946–960. DOI: 10.1038/s41418-022-00988-zSimon M, Köster G, Menon AG, Schramm J. Functional evidence for a role of combined CDKN2A (p16-p14(ARF))/CDKN2B (p15) gene inactivation in malignant gliomas. Acta Neuropathol. 1999;98(5):444–452. DOI: 10.1007/s004010051107Simon M, Köster G, Menon AG, Schramm J. Functional evidence for a role of combined CDKN2A (p16-p14(ARF))/CDKN2B (p15) gene inactivation in malignant gliomas. Acta Neuropathol. 1999;98(5):444–452. DOI: 10.1007/s004010051107Toouli CD, Huschtscha LI, Neumann AA, Noble JR, Colgin LM, Hukku B, Reddel RR. Comparison of human mammary epithelial cells immortalized by simian virus 40 T-Antigen or by the telomerase catalytic subunit. Oncogene. 2002;21(1):128–139. DOI: 10.1038/sj.onc.1205014Toouli CD, Huschtscha LI, Neumann AA, Noble JR, Colgin LM, Hukku B, Reddel RR. Comparison of human mammary epithelial cells immortalized by simian virus 40 T-Antigen or by the telomerase catalytic subunit. Oncogene. 2002;21(1):128–139. DOI: 10.1038/sj.onc.1205014Jiang XR, Jimenez G, Chang E, Frolkis M, Kusler B, Sage M, et al. Telomerase expression in human somatic cells does not induce changes associated with a transformed phenotype. Nat Genet. 1999;21(1):111–114. DOI: 10.1038/5056Jiang XR, Jimenez G, Chang E, Frolkis M, Kusler B, Sage M, et al. Telomerase expression in human somatic cells does not induce changes associated with a transformed phenotype. Nat Genet. 1999;21(1):111–114. DOI: 10.1038/5056Tyurin-Kuzmin PA, Karagyaur MN, Kulebyakin KY, Dyikanov DT, Chechekhin VI, Ivanova AM, et al. Functional Heterogeneity of Protein Kinase A Activation in Multipotent Stromal Cells. Int J Mol Sci. 2020;21(12):4442. DOI: 10.3390/ijms21124442Tyurin-Kuzmin PA, Karagyaur MN, Kulebyakin KY, Dyikanov DT, Chechekhin VI, Ivanova AM, et al. Functional Heterogeneity of Protein Kinase A Activation in Multipotent Stromal Cells. Int J Mol Sci. 2020;21(12):4442. DOI: 10.3390/ijms21124442Воронцова МВ, Кулебякин КЮ, Маказан НВ, Созаева ЛС, Тюрин-Кузьмин ПА. Паратиреоидный гормон в регуляции процессов роста и резорбции кости в норме и патологии. Вестник Российской академии медицинских наук. 2021;76(5):506–517.Vorontsova MV, Kulebyakin KY, Makazan NV, Sozaeva LS, Tyurin-Kuzmin PA. Parathyroid hormone in the regulation of bone growth and resorption processes in norm and pathology. Bulletin of the Russian Academy of Medical Sciences. 2021;76(5):506-517.Kulebyakin K, Tyurin-Kuzmin P, Efimenko A, Voloshin N, Kartoshkin A, Karagyaur M, et al. Decreased Insulin Sensitivity in Telomerase-Immortalized Mesenchymal Stem Cells Affects Efficacy and Outcome of Adipogenic Differentiation in vitro. Front Cell Dev Biol. 2021;9:662078. DOI: 10.3389/fcell.2021.662078Kulebyakin K, Tyurin-Kuzmin P, Efimenko A, Voloshin N, Kartoshkin A, Karagyaur M, et al. Decreased Insulin Sensitivity in Telomerase-Immortalized Mesenchymal Stem Cells Affects Efficacy and Outcome of Adipogenic Differentiation in vitro. Front Cell Dev Biol. 2021;9:662078. DOI: 10.3389/fcell.2021.662078Tyurin-Kuzmin PA, Chechekhin VI, Ivanova AM, Dyikanov DT, Sysoeva VY, Kalini-na NI, Tkachuk VA. Noradrenaline Sensitivity Is Severely Impaired in Immortalized Adipose-Derived Mesenchymal Stem Cell Line. Int J Mol Sci. 2018;19(12):3712. DOI: 10.3390/ijms19123712Tyurin-Kuzmin PA, Chechekhin VI, Ivanova AM, Dyikanov DT, Sysoeva VY, Kalini-na NI, Tkachuk VA. Noradrenaline Sensitivity Is Severely Impaired in Immortalized Adipose-Derived Mesenchymal Stem Cell Line. Int J Mol Sci. 2018;19(12):3712. DOI: 10.3390/ijms19123712Cai Y, Laustsen A, Zhou Y, Sun C, Anderson MV, Li S, et al. Targeted, homology-driven gene insertion in stem cells by ZFN-loaded ‘all-in-one’ lentiviral vectors. Elife. 2016;5:e12213. DOI: 10.7554/eLife.12213Cai Y, Laustsen A, Zhou Y, Sun C, Anderson MV, Li S, et al. Targeted, homology-driven gene insertion in stem cells by ZFN-loaded ‘all-in-one’ lentiviral vectors. Elife. 2016;5:e12213. DOI: 10.7554/eLife.12213Kane NM, Nowrouzi A, Mukherjee S, Blundell MP, Greig JA, Lee WK, et al. Lentivirus-mediated Reprogramming of Somatic Cells in the Absence of Transgenic Transcription Factors. Mol Ther. 2010;18(12):2139–2145. DOI: 10.1038/mt.2010.231Kane NM, Nowrouzi A, Mukherjee S, Blundell MP, Greig JA, Lee WK, et al. Lentivirus-mediated Reprogramming of Somatic Cells in the Absence of Transgenic Transcription Factors. Mol Ther. 2010;18(12):2139–2145. DOI: 10.1038/mt.2010.231Barsov EV. Telomerase and primary T cells: biology and immortalization for adoptive immunotherapy. Immunotherapy. 2011;3(3):407–421. DOI: 10.2217/imt.10.107Barsov EV. Telomerase and primary T cells: biology and immortalization for adoptive immunotherapy. Immunotherapy. 2011;3(3):407–421. DOI: 10.2217/imt.10.107Dos Santos A, Lyu N, Balayan A, Knight R, Zhuo KS, Sun Y, et al. Generation of Functional Immortalized Human Corneal Stromal Stem Cells. Int J Mol Sci. 2022;23(21):13399. DOI: 10.3390/ijms232113399Dos Santos A, Lyu N, Balayan A, Knight R, Zhuo KS, Sun Y, et al. Generation of Functional Immortalized Human Corneal Stromal Stem Cells. Int J Mol Sci. 2022;23(21):13399. DOI: 10.3390/ijms232113399Kalinina N, Kharlampieva D, Loguinova M, Butenko I, Pobeguts O, Efimenko A, et al. Characterization of secretomes provides evidence for adipose-derived mesenchymal stromal cells subtypes. Stem Cell Res Ther. 2015;6:221. DOI: 10.1186/s13287-015-0209-8Kalinina N, Kharlampieva D, Loguinova M, Butenko I, Pobeguts O, Efimenko A, et al. Characterization of secretomes provides evidence for adipose-derived mesenchymal stromal cells subtypes. Stem Cell Res Ther. 2015;6:221. DOI: 10.1186/s13287-015-0209-8Carvalho MM, Teixeira FG, Reis RL, Sousa N, Salgado AJ. Mesenchymal stem cells in the umbilical cord: phenotypic characterization, secretome and applications in central nervous system regenerative medicine. Curr Stem Cell Res Ther. 2011;6(3):221–228. DOI: 10.2174/157488811796575332Carvalho MM, Teixeira FG, Reis RL, Sousa N, Salgado AJ. Mesenchymal stem cells in the umbilical cord: phenotypic characterization, secretome and applications in central nervous system regenerative medicine. Curr Stem Cell Res Ther. 2011;6(3):221–228. DOI: 10.2174/157488811796575332

The authors declare that there are no conflicts of interest present.