<?xml version="1.0" encoding="UTF-8"?>
<!DOCTYPE article PUBLIC "-//NLM//DTD JATS (Z39.96) Journal Publishing DTD v1.3 20210610//EN" "JATS-journalpublishing1-3.dtd">
<article article-type="research-article" dtd-version="1.3" xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" xmlns:xlink="http://www.w3.org/1999/xlink" xmlns:xsi="http://www.w3.org/2001/XMLSchema-instance" xml:lang="ru"><front><journal-meta><journal-id journal-id-type="publisher-id">regmedjournal</journal-id><journal-title-group><journal-title xml:lang="ru">Регенерация органов и тканей</journal-title><trans-title-group xml:lang="en"><trans-title>Регенерация органов и тканей</trans-title></trans-title-group></journal-title-group><issn pub-type="epub">2949-5938</issn><publisher><publisher-name>Общество регенеративной медицины</publisher-name></publisher></journal-meta><article-meta><article-id pub-id-type="doi">10.60043/2949-5938-2024-2-46-58</article-id><article-id custom-type="elpub" pub-id-type="custom">regmedjournal-67</article-id><article-categories><subj-group subj-group-type="heading"><subject>Research Article</subject></subj-group><subj-group subj-group-type="section-heading" xml:lang="ru"><subject>ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ</subject></subj-group><subj-group subj-group-type="section-heading" xml:lang="en"><subject>ORIGINAL ARTICLES</subject></subj-group></article-categories><title-group><article-title>Сравнение культуральных сред для мезенхимных стромальных клеток жировой ткани человека как объекта исследования и производственного культивирования</article-title><trans-title-group xml:lang="en"><trans-title>Comparison of culture media for human adipose tissue mesenchymal stromal cells as an object of research and industrial cultivation</trans-title></trans-title-group></title-group><contrib-group><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Григорьева</surname><given-names>О. А.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Grigorieva</surname><given-names>O. A.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>Григорьева Ольга Александровна — к.б.н., н.с. лаборатории репарации и регенерации тканей</p><p>119192, Москва, Ломоносовский проспект, 27, к. 10</p><p>119192, Москва, Ломоносовский проспект, 27, к. 1</p></bio><bio xml:lang="en"><p>Olga A. Grigorieva - Cand. Sci. (Biology), research assistant of the Laboratory of Tissue Repair and Regeneration; senior research assistant of the Research Institute of Gene and Cellular Technologies</p><p>Moscow, Lomonosovsky prospect 27, b. 10, 119192</p><p>Moscow, Lomonosovsky prospect, 27, b. 1, Russia, 119192</p></bio><xref ref-type="aff" rid="aff-1"/></contrib><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Басалова</surname><given-names>Н. А.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Basalova</surname><given-names>N. A.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>Басалова Наталия Андреевна - к.б.н., м.н.с. лаборатории репарации и регенерации тканей</p><p>119192, Москва, Ломоносовский проспект, 27, к. 10</p></bio><bio xml:lang="en"><p>Nataliya A. Basalova - Cand. Sci. (Biology), junior research assistant of the Laboratory of Tissue Repair and Regeneration; junior research assistant</p><p>Moscow, Lomonosovsky prospect 27, b. 10, 119192</p></bio><xref ref-type="aff" rid="aff-2"/></contrib><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Коробкина</surname><given-names>И. О.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Korobkina</surname><given-names>I. O.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>Коробкина Ирина Олеговна — ведущий инженер Центра регенеративной медицины</p><p>119192, Москва, Ломоносовский проспект, 27, к. 10</p></bio><bio xml:lang="en"><p>Irina O. Korobkina - leading engineer</p><p>Moscow, Lomonosovsky prospect 27, b. 10, 119192</p></bio><xref ref-type="aff" rid="aff-3"/></contrib><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Бирюкова</surname><given-names>В. Н.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Biryukova</surname><given-names>V. N.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>Бирюкова Виктория Николаевна - аспирант кафедры биохимии и регенеративной биомедицины</p><p>119192, Москва, Ломоносовский проспект, 27, к. 10</p><p>119192, Москва, Ломоносовский проспект, 27, к. 1</p></bio><bio xml:lang="en"><p>Victoria N. Biryukova - post-graduate researcher, Department of Biochemistry and Regenerative Biomedicine</p><p>Moscow, Lomonosovsky prospect 27, b. 10, 119192</p><p>Moscow, Lomonosovsky prospect, 27, b. 1, 119192</p></bio><xref ref-type="aff" rid="aff-4"/></contrib><contrib contrib-type="author" corresp="yes"><name-alternatives><name name-style="eastern" xml:lang="ru"><surname>Макаревич</surname><given-names>П. И.</given-names></name><name name-style="western" xml:lang="en"><surname>Makarevich</surname><given-names>P. I.</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="ru"><p>Макаревич Павел Игоревич - к.м.н., заведующий лабораторией медицинской биоинженерии; доцент кафедры биохимии и регенеративной биомедицины; генеральный директор</p><p>119192, Москва, Ломоносовский проспект, 27, к. 10</p><p>119192, Москва, Ломоносовский проспект, 27, к. 1</p><p>119234, Москва, тер. Ленинские Горы, д. 1 стр. 77</p></bio><bio xml:lang="en"><p>Pavel I. Makarevich - M.D., Cand. Sci. (Medicine), head of the Laboratory of Medical bioengineering; Associate Professor of the Department of Biochemistry and Regenerative Biomedicine; CEO</p><p>Moscow, Lomonosovsky prospect 27, b. 10, 119192</p><p>Moscow, Lomonosovsky prospect, 27, b. 1, 119192</p><p>Moscow, ter. Leninskie gory, 1, b. 77, 119234</p></bio><email xlink:type="simple">makarevichpi@my.msu.ru</email><xref ref-type="aff" rid="aff-5"/></contrib></contrib-group><aff-alternatives id="aff-1"><aff xml:lang="ru"><institution>Центр регенеративной медицины Медицинского научно-образовательного института ФГБОУ ВО «Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова»; Факультет фундаментальной медицины Медицинского научно-образовательного института ФГБОУ ВО «Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова»</institution><country>Россия</country></aff><aff xml:lang="en"><institution>Centre for Regenerative Medicine, Medical Research and Education Institute, Lomonosov Moscow State University; Faculty of Medicine, Lomonosov Moscow State University,  Moscow, Lomonosovsky prospect</institution><country>Russian Federation</country></aff></aff-alternatives><aff-alternatives id="aff-2"><aff xml:lang="ru"><institution>Центр регенеративной медицины Медицинского научно-образовательного института ФГБОУ ВО «Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова»</institution><country>Россия</country></aff><aff xml:lang="en"><institution>Centre for Regenerative Medicine, Medical Research and Education Institute, Lomonosov&#13;
Moscow State University</institution><country>Russian Federation</country></aff></aff-alternatives><aff-alternatives id="aff-3"><aff xml:lang="ru"><institution>Центр регенеративной медицины Медицинского научно-образовательного института ФГБОУ ВО «Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова»</institution><country>Россия</country></aff><aff xml:lang="en"><institution>Centre for Regenerative Medicine, Medical Research and Education Institute, Lomonosov Moscow State University</institution><country>Russian Federation</country></aff></aff-alternatives><aff-alternatives id="aff-4"><aff xml:lang="ru"><institution>Центр регенеративной медицины Медицинского научно-образовательного института ФГБОУ ВО «Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова»; Факультет фундаментальной медицины Медицинского научно-образовательного института ФГБОУ ВО «Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова»</institution><country>Россия</country></aff><aff xml:lang="en"><institution>Centre for Regenerative Medicine, Medical Research and Education Institute, Lomonosov&#13;
Moscow State University; Faculty of Medicine, Lomonosov Moscow State University</institution><country>Russian Federation</country></aff></aff-alternatives><aff-alternatives id="aff-5"><aff xml:lang="ru"><institution>Центр регенеративной медицины Медицинского научно-образовательного института&#13;
ФГБОУ ВО «Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова»; Факультет фундаментальной медицины Медицинского научно-образовательного института ФГБОУ ВО «Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова»; ООО «Генная и клеточная терапия»</institution><country>Россия</country></aff><aff xml:lang="en"><institution>Centre for Regenerative Medicine, Medical Research and Education Institute, Lomonosov&#13;
Moscow State University; Faculty of Medicine, Lomonosov Moscow State University; LLC “Gene and cell therapy”</institution><country>Russian Federation</country></aff></aff-alternatives><pub-date pub-type="collection"><year>2024</year></pub-date><pub-date pub-type="epub"><day>22</day><month>03</month><year>2025</year></pub-date><volume>2</volume><issue>2</issue><fpage>46</fpage><lpage>58</lpage><permissions><copyright-statement>Copyright &amp;#x00A9; Григорьева О.А., Басалова Н.А., Коробкина И.О., Бирюкова В.Н., Макаревич П.И., 2025</copyright-statement><copyright-year>2025</copyright-year><copyright-holder xml:lang="ru">Григорьева О.А., Басалова Н.А., Коробкина И.О., Бирюкова В.Н., Макаревич П.И.</copyright-holder><copyright-holder xml:lang="en">Grigorieva O.A., Basalova N.A., Korobkina I.O., Biryukova V.N., Makarevich P.I.</copyright-holder><license xml:lang="ru" license-type="creative-commons-attribution" xlink:href="https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/" xlink:type="simple"><license-p>Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.</license-p></license><license xml:lang="en" license-type="creative-commons-attribution" xlink:href="https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/" xlink:type="simple"><license-p>This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.</license-p></license></permissions><self-uri xlink:href="https://www.regmed-journal.ru/jour/article/view/67">https://www.regmed-journal.ru/jour/article/view/67</self-uri><abstract><p>Выбор условий культивирования клеточных линий является лимитирующим фактором для процедур получения, размножения клеток in vitro, а также для разработки лекарственных препаратов на их основе. В данной работе мы проанализировали характеристики первичных линий мезенхимных стромальных клеток (МСК) человека, полученных из жировой ткани, выделенных и культивированных в среде роста с добавлением сыворотки AdvanceSTEM™ (Cytiva) и бессывороточной среде CellCor™ Serum free CDM for hMSC (Xcell). Использование двух типов сред позволяло получить жизнеспособные клеточные линии МСК из жировой ткани человека. При этом скорость пролиферации в бессывороточной среде оказалась выше, что выражалось в укорочении PDT, lag-фазы, времени между пассажами как при культивировании свежевыделенных клеток, так и после разморозки линий, изначально культивированных на среде с сывороткой. Однако использование стандартного протокола криоконсервации клеток, выделенных и культивированных на среде CellCor™, не позволило эффективно выводить эти линии из разморозки. Кроме того, была обнаружена склонность МСК собираться в кластеры при использовании этой среды, что свидетельствует о необходимости дальнейшего подбора условий работы с ней. МСК являются одними из наиболее перспективных клеток для разработки продуктов для регенеративной медицины, в частности за счет секретируемых этими клетками белков. Концентрации факторов роста VEGF, IGF, HGF и ангиопоэтина-1 в кондиционированной клетками среде роста значительно не отличались при культивировании в двух средах. Также не было обнаружено статистически значимых различий в концентрации и размерах внеклеточных везикул в среде. Таким образом, применение бессывороточной среды CellCor™ позволяет освободиться от ксеногенных продуктов и может уменьшить время наработки клеточной массы МСК, что является важным параметром при разработке клеточных продуктов, не изменяя секреторные свойства этих клеток по сравнению с культивированием в среде AdvanceSTEM™, однако требуется дальнейший подбор условий для оптимизации протоколов.</p></abstract><trans-abstract xml:lang="en"><p>The choice of cell culturing conditions is a limiting factor for the procedures of obtaining and expanding cells in vitro, as well as for developing drugs based on them. In this work, we analyzed the characteristics of primary human mesenchymal stromal cell (MSC) lines obtained from adipose tissue, isolated and cultured in a growth medium supplemented with AdvanceSTEM™ serum (Cytiva) and a serum-free medium CellCor™ Serum free CDM for hMSC (Xcell). The use of two types of media made it possible to obtain viable MSC cell lines from human adipose tissue. At the same time, the proliferation rate in the serum-free medium was higher, which was expressed in shortening of PDT, lag phase, time between passages, both during cultivation of freshly isolated cells and after defrosting of lines initially cultured in a medium with serum. However, the use of a standard cryopreservation protocol for cells isolated and cultured in CellCor™ medium did not allow for the effective recovery of these lines from thawing. In addition, a tendency for MSCs to form clusters was found when using this medium, indicating the need for further selection of working conditions with it. MSCs are among the most promising cells for the development of products for regenerative medicine, in particular, due to the proteins secreted by these cells. The concentrations of growth factors VEGF, IGF, HGF and angiopoietin-1 in the cell-conditioned growth medium did not differ significantly when cultured in the two media. Also, no statistically significant differences were found in the concentration and size of extracellular vesicles in the medium. Thus, the use of the serum-free CellCor™ medium allows for the elimination of xenogenic products and can reduce the time of MSC cell mass production, which is an important parameter in the development of cell products, without changing the secretory properties of these cells compared to cultivation in the AdvanceSTEM™ medium, however, further selection of conditions is required to optimize the protocols.</p></trans-abstract><kwd-group xml:lang="ru"><kwd>культуральная среда</kwd><kwd>МСК</kwd><kwd>клеточная культура</kwd><kwd>жировая ткань</kwd></kwd-group><kwd-group xml:lang="en"><kwd>growth medium</kwd><kwd>MSCs</kwd><kwd>cell culture</kwd><kwd>adipose tissue</kwd></kwd-group><funding-group><funding-statement xml:lang="ru">Работы проведены в рамках государственного задания МГУ имени М.В. Ломоносова. Авторы благодарят ООО «Внешбиоторг» за предоставленные реагенты для ряда экспериментов.</funding-statement><funding-statement xml:lang="en">The work was carried out under state assignment of Lomonosov Moscow State University. The authors express their gratitude to «Vneshbiotorg» LLC for reagent supply.</funding-statement></funding-group></article-meta></front><back><ref-list><title>References</title><ref id="cit1"><label>1</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Charwat V, Kasper C, Lavrentieva A. Cell Culture Technology. Cham: Springer International Publishing: Imprint: Springer; 2018.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Charwat V, Kasper C, Lavrentieva A. Cell Culture Technology. Cham: Springer International Publishing: Imprint: Springer; 2018.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit2"><label>2</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Ciccocioppo R, Cantore A, Chaimov D, Orlando G. Regenerative medicine: the red planet for clinicians. Intern Emerg Med. 2019;14(6):911–921.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Ciccocioppo R, Cantore A, Chaimov D, Orlando G. Regenerative medicine: the red planet for clinicians. Intern Emerg Med. 2019;14(6):911–921.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit3"><label>3</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Freshney RI, Capes-Davis A, Gregory C, Przyborski S. Culture of animal cells : a manual of basic technique and specialized applications. Seventh edition. ed. Hoboken, New Jersey: Wiley Blackwell; 2016. xxxviii, 684 p.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Freshney RI, Capes-Davis A, Gregory C, Przyborski S. Culture of animal cells : a manual of basic technique and specialized applications. Seventh edition. ed. Hoboken, New Jersey: Wiley Blackwell; 2016. xxxviii, 684 p.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit4"><label>4</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Caplan AI, Correa D. The MSC: an injury drugstore. Cell Stem Cell. 2011;9(1):11–15.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Caplan AI, Correa D. The MSC: an injury drugstore. Cell Stem Cell. 2011;9(1):11–15.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit5"><label>5</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Krampera M, Le Blanc K. Mesenchymal stromal cells: Putative microenvironmental modulators become cell therapy. Cell Stem Cell. 2021;28(10):1708–1725.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Krampera M, Le Blanc K. Mesenchymal stromal cells: Putative microenvironmental modulators become cell therapy. Cell Stem Cell. 2021;28(10):1708–1725.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit6"><label>6</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Vizoso FJ, Eiro N, Cid S, Schneider J, Perez-Fernandez R. Mesenchymal Stem Cell Secretome: Toward Cell-Free Therapeutic Strategies in Regenerative Medicine. Int J Mol Sci. 2017;18(9), 1852.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Vizoso FJ, Eiro N, Cid S, Schneider J, Perez-Fernandez R. Mesenchymal Stem Cell Secretome: Toward Cell-Free Therapeutic Strategies in Regenerative Medicine. Int J Mol Sci. 2017;18(9), 1852.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit7"><label>7</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Kalinina N, Kharlampieva D, Loguinova M, Butenko I, Pobeguts O, Efimenko A, et al. Characterization of secretomes provides evidence for adipose-derived mesenchymal stromal cells subtypes. Stem Cell Res Ther. 2015;6:221.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Kalinina N, Kharlampieva D, Loguinova M, Butenko I, Pobeguts O, Efimenko A, et al. Characterization of secretomes provides evidence for adipose-derived mesenchymal stromal cells subtypes. Stem Cell Res Ther. 2015;6:221.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit8"><label>8</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Sagaradze G, Grigorieva O, Nimiritsky P, Basalova N, Kalinina N, Akopyan Z, et al. Conditioned Medium from Human Mesenchymal Stromal Cells: Towards the Clinical Translation. Int J Mol Sci. 2019;20(7), 1656.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Sagaradze G, Grigorieva O, Nimiritsky P, Basalova N, Kalinina N, Akopyan Z, et al. Conditioned Medium from Human Mesenchymal Stromal Cells: Towards the Clinical Translation. Int J Mol Sci. 2019;20(7), 1656.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit9"><label>9</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Grigorieva O, Arbatskiy M, Novoseletskaya E, Dyachkova U, Ishkin A, Kalinina N, et al. Platelet-Derived Growth Factor Induces SASP-Associated Gene Expression in Human Multipotent Mesenchymal Stromal Cells but Does Not Promote Cell Senescence. Biomedicines. 2021;9(10), 1290.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Grigorieva O, Arbatskiy M, Novoseletskaya E, Dyachkova U, Ishkin A, Kalinina N, et al. Platelet-Derived Growth Factor Induces SASP-Associated Gene Expression in Human Multipotent Mesenchymal Stromal Cells but Does Not Promote Cell Senescence. Biomedicines. 2021;9(10), 1290.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit10"><label>10</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Uzman A. Molecular Cell Biology (4th edition): Harvey Lodish, Arnold Berk, S. Lawrence Zipursky, Paul Matsudaira, David Baltimore and James Darnell; Freeman &amp; Co., New York, NY, 2000, 1084 p. ISBN 0-7167-3136-3. Biochemistry and Molecular Biology Education. 2001;29(3):126-8.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Uzman A. Molecular Cell Biology (4th edition): Harvey Lodish, Arnold Berk, S. Lawrence Zipursky, Paul Matsudaira, David Baltimore and James Darnell; Freeman &amp; Co., New York, NY, 2000, 1084 p. ISBN 0-7167-3136-3. Biochemistry and Molecular Biology Education. 2001;29(3):126-8.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit11"><label>11</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Leuning DG, Beijer NRM, du Fosse NA, Vermeulen S, Lievers E, van Kooten C, et al. The cytokine secretion profile of mesenchymal stromal cells is determined by surface structure of the microenvironment. Sci Rep. 2018;8(1):7716.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Leuning DG, Beijer NRM, du Fosse NA, Vermeulen S, Lievers E, van Kooten C, et al. The cytokine secretion profile of mesenchymal stromal cells is determined by surface structure of the microenvironment. Sci Rep. 2018;8(1):7716.</mixed-citation></citation-alternatives></ref><ref id="cit12"><label>12</label><citation-alternatives><mixed-citation xml:lang="ru">Potapova IA, Gaudette GR, Brink PR, Robinson RB, Rosen MR, Cohen IS, et al. Mesenchymal stem cells support migration, extracellular matrix invasion, proliferation, and survival of endothelial cells in vitro. Stem Cells. 2007;25(7):1761–1768.</mixed-citation><mixed-citation xml:lang="en">Potapova IA, Gaudette GR, Brink PR, Robinson RB, Rosen MR, Cohen IS, et al. Mesenchymal stem cells support migration, extracellular matrix invasion, proliferation, and survival of endothelial cells in vitro. Stem Cells. 2007;25(7):1761–1768.</mixed-citation></citation-alternatives></ref></ref-list><fn-group><fn fn-type="conflict"><p>The authors declare that there are no conflicts of interest present.</p></fn></fn-group></back></article>
